i.Mune® bisuPrep [RUO]

(nur für Forschungszwecke; nicht verfügbar in den Vereinigten Staaten von Amerika)

Das i.Mune bisuPrep [RUO] Kit enthält die für die Bisulfit-Konvertierung und die anschließende DNA-Extraktion aus menschlichen Proben erforderlichen Reagenzien.

Das Kit wurde für 40 µl Vollblut oder einen 6-mm-Stanzling aus getrocknetem Blut validiert. Auch andere Probenarten (siehe Liste unten) können verarbeitet werden.

Die Proben werden lysiert und die freigesetzte genomische DNA wird 45 Minuten lang bei 80 °C bisulfitiert. Die DNA wird an magnetische Partikel gebunden und zweimal gewaschen. Nach einem Trocknungsschritt wird die bisulfitkonvertierte DNA für die anschließende Analyse in PCR- oder NGS-Anwendungen eluiert.

Das i.Mune bisuPrep Kit enthält alle Reagenzien für die Bisulfit-Umwandlung und die Extraktion genomischer DNA aus menschlichen Proben. Nach der Lyse und der Bisulfit-Umwandlung (45 min bei 80 °C) wird die DNA an Magnetkügelchen gebunden, zweimal gewaschen und die bisulfitierte DNA zur anschließenden Analyse in PCR- oder NGS-Anwendungen eluiert. Das Kit eignet sich für eine Vielzahl von Probentypen. 

Mit diesem Kit lassen sich folgende Probenarten verarbeiten:

• Vollblut
• PBMC
• Buffy Coats
• Extrahierte DNA
• Trockenblut (DBS)
• Andere Körperflüssigkeiten, z.B. Liquor, Speichel

Wir konnten zeigen, dass das Protokoll für getrocknete Blutproben verwendet werden kann, die mit den folgenden Systemen entnommen wurden:

• Whatman™ 903™ Protein Saver Cards
• Ahlstrom-Munksjö BioSample Cards
• Capitainer qDBS Cards
• TASSO ONDEMAND
• ReadyGo™ GoTest™ Tubes
• Neoteryx Mitra® Device
• cobas® Plasma Separation Cards (PSC)
• SampleFacts InstaSep™ Cards

Das Verfahren zur Bisulfit-Umwandlung und DNA-Extraktion mit dem i.Mune bisuPrep Kit wurde auf dem KingFisher™ Flex-Roboter automatisiert. Das Protokoll ist auf Anfrage erhältlich.